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Ultra HiFidelity PCR Kit Ⅱ(KP213)

说明:本产品未获得医疗器械注册证,不可用于临床诊断或治疗,仅可用于工业或者科研领域非医疗目的用途。

  目录号 规 格 价 格
KP213-01 1ml 580元
KP213-02 5×1ml 2480元
KP213-03 3×5×1ml 6980元
产品简介
Ultra HiFidelity PCR KitⅡ是一种新型高保真PCR扩增预混液。适用于PCR相关的克隆和检测。
扩增预混液中的Ultra HiFi DNA PolymeraseⅡ是通过定向分子进化技术开发得到的新型超强高保真DNA聚合酶,相比于Ultra HiFi DNA Polymerase,它有更强的3- 5’外切酶活性(Proofreading活性),提高了DNA扩增过程中的真实性;同时,增强了该酶对模板的亲和力,提升了酶的灵敏度和延伸能力。上述两方面的改良,使得新酶在PCR扩增成功率和长片段扩增方面得到了加强,从而提高了本产品的扩增和后续克隆的效率。此外,本产品中的DNA聚合酶具有热启动(Hot Start)功能,可有效的控制低温情况下的非特异扩增和酶活损耗,进而保证了PCR扩增的特异性和稳定性。

产品特点
高保真性:为Taq聚合酶的180倍。
模板普适性:能够识别GC含量30%~80%的不同物种DNA片段。
延伸力强:可扩增长至20 kbDNA片段。
高灵敏度:基因组模板用量可低至1 ng
操作简便:只需加入模板和引物,轻松配好体系,PCR产物平末端,纯化后可直接用于无缝克隆。

适用范围
用于DNA的高保真扩增,如基因表达克隆、基因定点突变、基因组点突变的分析(SNP)等。

储存条件
-30~-15℃保存一年。

实验例

1.扩增普适性
使用不同高保真酶分别扩增不同来源、不同长度的片段。结果显示,KP213在扩增能力、特异性、普适性、长片段扩增效率方面的综合性能表现优秀。

A: TIANGEN KP213; B: TY 公司高保真酶;C: K 公司高保真酶。模板上样量:基因组DNA200 ng; λ DNA, 50 ng
M: TIANGEN D15000 Marker1: 0.75 kb; 2: 1 kb; 3: 2 kb; 4: 3.9 kb; 5: 6 kb; 6: 0.48 kb (GC 75%); 7: 1.5 kb (GC 71%); 8: 2 kb; 9: 8.2 kb; 10: 2.3 kb; 11: 2 kb; 12: 3 kb; 13: 8.2 kb; 14: 8.1 kb; 15: 15 kb

2.高低GC模板适用性
使用KP213分别扩增 GC含量低(30%~35%)和高(65%~79%)的基因序列,都得到了特异的扩增产物,说明该酶对高低GC模板具有广泛的兼容性。

M: TIANGEN DNA Marker Ⅳ。
1: 0.4 kb, GC 75%; 2: 0.7 kb, GC 30%; 3: 1.1 kb, GC 79%; 4: 1.5 kb, GC 71%; 5: 1.9 kb, GC 72%; 6: 2.4 kb, GC 35%; 7: 3.9 kb, GC 70%; 8: 4.1 kb, GC 65%。

3.大片段扩增
普通的高保真DNA聚合酶对大片段扩增存在一定困难,而KP213对大片段具有优秀的扩增能力。

M: TIANGEN D15000 Marker。 1-4: 模板为水稻基因组DNA; 5-7: 模板为水稻cDNA。
1: 8.3 kb; 2: 13.3 kb; 3: 13.9 kb; 4: 16.5 kb; 5: 5.3 kb; 6: 6.5 kb; 7: 12.9 kb

4.灵敏度
采用KP213以人类或者水稻基因组不同浓度DNA为模板分别扩增不同的基因片段,低至1ng的模板扩增产物清晰可见。

M: TIANGEN D15000 Marker1:模板量200 ng; 2:模板量100 ng; 3:模板量10 ng; 4:模板量5 ng; 5:模板量1 ng

5.保真性
采用KP213和市场主流产品扩增4kb DNA片段(35个循环),产物用TIANGEN PCR-free建库试剂盒进行建库,illumina平台测1G数据量,后续根据各产品扩增碱基突变率得出产品的保真性。TIANGEN KP213保真性可达Taq酶的180倍。


 
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